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CLIA试剂盒有哪些注意事项

   CLIA试剂盒包括化学发光分析系统和免疫反应系统。免疫反应系统原理与酶联免疫吸附试验原理基本相同,只是连接的标记物为发光物质而不是酶,不需要显色,由化学发光分析系统完成。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子,利用发光信号测量仪器光量子产率。化学发光免疫分析技术灵敏度高、特异性强、CLIA试剂盒价格低、方法稳定快速、检测范围宽、操作简单更易于自动化。
  
  CLIA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中山羊内啡肽水平。用纯化的山羊内啡肽抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内啡肽,再与HRP标记的内啡肽抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的内啡肽呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品中山羊内啡肽浓度。
  
  CLIA试剂盒注意事项:
  
  1.CLIA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  
  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  
  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  
  4.请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数。
  
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  
  6.底物请避光保存。
  
  7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  
  

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